Serial Spider-Noir menghadirkan pendekatan berbeda terhadap dunia Spider-Man dengan latar era Prohibition di New York. Nuansa gelap khas noir dipadukan dengan kemunculan para kriminal berkekuatan super, yang menjadi pemicu kembalinya sosok vigilante The Spider setelah lama menghilang.
Menariknya, deretan villain yang dihadirkan tidak hanya berfokus pada kekuatan, tetapi juga sisi manusiawi dan latar belakang yang kompleks. Berikut adalah daftar karakter antagonis yang dipastikan atau diduga akan mewarnai konflik dalam serial ini.
